Q
可否使用之前的建库试剂盒（货号：101KL114）进行建库，文库可否使用之前的测序试剂盒（货号：1000028455）进行测序？
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可以用之前的建库试剂盒（货号：101KL114）进行FFPE文库构建，但是构建出来的文库需要用新版的时空可视化试剂套装（货号：940-001895-00）进行测序
Q
在进行时空转录组FFPE的解交联实验流程中，解交联试剂可以反复预热吗？解交联步骤95℃结束之后是否需要等到下一个反应温度，还是可以拿出芯片？
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1、解交联试剂可以反复预热；
2、解交联步骤95℃降温后就可以拿出来，不需要等到下一个反应温度
Q
在进行时空转录组FFPE的生化流程中，如果不拍照，不需要看track线，贴片时能100%贴满芯片吗？
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从技术角度是可以贴满芯片，但是如果切片全覆盖到芯片上，可能存在以下风险点：1. 可能会戳到切片的边角；2. 可能会导致影像图无法识别track线导致QC fail，配准困难。
Q
对于时空转录组FFPE 生化流程第三方物料中，试剂TE buffer(pH 9.0)可否用调试好的？能否替换为其他非推荐品牌货号试剂？
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1、不建议使用直接调试好的TE buffer(pH 9.0)。
2、建议直接使用推荐的品牌货号试剂，不建议使用其他非推荐品牌。
Q
对于FFPE的样本，拍照前盖玻片封片后发现有气泡存在，可以取下盖玻片重新封片操作吗？
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Q
在进行时空转录组FFPE的生化流程中，对切片进行捞片的时候，如果没贴好能重新贴吗？
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建议在漂片的时候观察组织形态，如果没有贴牢固，放回液体后切片飘起来了可以重新贴片，如果已经与芯片贴牢固，不能飘起来，就不能重新贴片了。
Q
在进行时空转录组FFPE的生化流程中，贴片后进行烤片时（42˚C烤3h后37˚C烤片过夜），PCR仪能否换为烘箱？烤片时可以盖PCR仪盖吗？烤片最少需要多久时间？是必须37℃烤片过夜吗？
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1、在进行时空转录组FFPE的生化流程中，贴片后进行烤片时（42˚C烤3h后37˚C烤片过夜），PCR仪可以替换为烘箱。
2、可以盖PCR仪盖进行烤片。
3、烤片时间建议按照说明书进行操作。
Q
如果想用时空转录组检测组织样本中的微生物，是选择FF样本比较好还是用FFPE样本比较好？
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对于时空转录组，目前只有FFPE试剂盒及实验流程可以兼容微生物检测。
Q
时空转录组适用于FFPE骨组织样本吗？如果对骨组织预先进行脱钙处理，对捕获结果会有什么影响？
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1、骨组织是易脱片样本，即便是脱钙处理也会有脱片风险。
2、如果对骨组织预先进行脱钙处理，对捕获率会有一定程度的影响。
Q
进行时空转录组的FFPE样本，推荐的切片厚度是多少？FFPE样本的切片厚度不考虑样本本身细胞的大小吗？切片厚度从5μm下降到4μm对捕获量有影响吗？
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1、对于FFPE样本的切片厚度，一般建议是5μm，但对于脂肪含量高的FFPE样本或者容易脱片的FFPE样本，建议选择4μm的切片厚度。
2、FFPE样本一般是病理组织，经过固定脱水的组织细胞会缩小，所以建议切片5μm厚度，切片厚度也可以根据老师的科研需求自行调整。
3、切片厚度对捕获影响不大，若项目执行有一致性要求可遵循同项目其他样本操作要求即可。
